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发酵工程

发酵罐无菌系统无菌空气的检测

作者 MFermentaion
2025年3月18日 1 分钟阅读
0

无菌空气系统是发酵系统中至关重要的一部分,在发酵罐染菌排除工作中,怎么样来排除空气系统本身的故障有时候就会成为必须要做的工作。

城市空气中含菌量:103~104个/m3

种类:酵母、霉菌、放线菌和噬菌体

北方>南方

高处<低处,采风口高于10m

农村<城市


无菌空气的检查是发酵工业必需的工作内容,但要准确地测定无菌空气中的含菌量有一定的困难。常用的检测方法:光学法和肉汤培养基测定法

1.光学检查法


利用微粒对光线的散射作用来测量空气中粒子的大小和数量(不是活菌数)。测量时以一定的速度将试样空气通过检测区,同时用聚光透镜将光源束射入检测区。通过仪器检测空气中的0.5~5μm微粒的浓度。通过空气中的微粒浓度来衡量杂菌量。


2.肉汤培养基检查法


            1.进气口,2出气口,6中为肉汤培养基4,要在液面以下

肉汤培养基:0.5% 牛肉膏,1.0%的蛋白胨、0.5%的氯化钠,pH7.0-7.4,121℃灭菌30min。


使用方法:取经过滤空气从1口进入,连续取样数小时或十几小时,然后在37℃下培养16h,出现浑浊则表明空气中有菌。


沉降法测定空气中微生物含量的方法



  •  培养基

牛肉蛋白胨培养基配方: 牛肉膏  5.0g, 蛋白胨 10.0g,NaCl 5g, 水1000ml,pH 7.2~7.4 

马铃薯培养基配方: 马铃薯   200g, 蔗糖 20g, 水1000ml, pH 7.2 

高氏一号培养基配方: 淀粉  20g, 硝酸钾 1.0g, 磷酸氢二钾 0.5g, 硫酸镁0.5g, 氯化钠0.5g, 硫酸亚铁0.01g, 水1000ml, pH 7.2~7.4 2. 

  • 实验方法 

1.倒平板:按常法配置上述培养基,分装于三角瓶中,高压灭菌备用。临用前将培养基熔化,冷却至50℃左右,各倒16个平板备用。 

2.暴露取样 

在指定的地点草地,一层楼,三层楼,七层楼各放4皿,将平板皿盖打开,在空气中暴露5min和10min,时间一到,立即合上皿盖。 

3. 培养观察: 细菌置于37℃培养,放线菌培养基平板和真菌培养基平板置于28℃培养。细菌培养48h,真菌和放线菌培养4-6天。计数平板上的菌落,观察各种菌落的形态、大小、颜色等特征。 

4.计算1m3空气中微生物的数目 

如面积为100㎝2的平板培养基,暴露在空气中5分钟,置于37℃培养24小时后所生长的菌落数,相当于10L空气中的细菌数。  

X:每m3空气中的细菌数

N:平板暴露5分钟,置37℃培养24小时后生长的菌落数

 r:平皿底半径(㎝)


作者

MFermentaion

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