微生物常用培养基

培养基是微生物生长繁殖、代谢研究及分离鉴定的核心基础，不同微生物的营养需求差异显著，因此需根据微生物种类选择适配的培养基。以下按细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、支原体、衣原体、病毒等主要微生物类别，整理常用培养基及关键信息，兼顾基础配方、用途及特点，方便实验选用。

一、细菌常用培养基

细菌营养需求相对简单，多数可利用糖类作为碳源、氨基酸或铵盐作为氮源，常用培养基分为基础培养基、选择性培养基和鉴别培养基三类，适配不同分离、培养及鉴定需求。

（一）基础培养基

1. 营养肉汤（Nutrient Broth, NB）

配方（1000mL）：蛋白胨10g、牛肉膏5g、NaCl 5g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（121℃、101kPa灭菌20min）。

用途：适用于大多数异养型细菌的基础培养，如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等，可用于细菌的增殖、传代，也可作为制备其他选择性培养基、鉴别培养基的基础。

特点：营养均衡，成分简单，能满足细菌生长的基本营养需求，通用性强。

2. 营养琼脂（Nutrient Agar, NA）

配方（1000mL）：营养肉汤配方基础上，添加15-20g琼脂，pH 7.2-7.4（灭菌条件同营养肉汤）。

用途：固体培养基，用于细菌的分离、纯化、计数及菌落形态观察，是微生物实验室最常用的基础固体培养基，可分离环境、样品中的常见细菌。

特点：凝固性好，营养充足，菌落形态清晰，便于观察和挑取。

3. LB培养基（Luria-Bertani Medium, LB）

配方（1000mL）：蛋白胨10g、酵母膏5g、NaCl 10g、蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2；固体培养基需添加15-20g琼脂，121℃、101kPa灭菌20min。

用途：应用最广泛的细菌基础培养基之一，适用于大肠杆菌等革兰氏阴性菌的增殖、传代、菌种保藏，也是分子生物学实验（如质粒提取、转化）中最常用的培养基，可快速获得大量细菌菌体。

特点：营养丰富，成分简单，细菌生长速度快，通用性极强，适配大多数异养型细菌，是微生物实验室常规培养的首选培养基之一。

（二）选择性培养基

1. 麦康凯培养基（MacConkey Agar, MAC）

配方（1000mL）：蛋白胨17g、胰蛋白胨3g、乳糖10g、胆盐5g、NaCl 5g、中性红0.03g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（灭菌后冷却至50℃左右倒平板）。

用途：选择性分离革兰氏阴性菌，抑制革兰氏阳性菌生长（胆盐的作用）；同时为鉴别培养基，可区分乳糖发酵菌与非发酵菌——乳糖发酵菌（如大肠杆菌）形成红色菌落，非发酵菌（如沙门氏菌、变形杆菌）形成无色或淡黄色菌落。

特点：兼具选择性和鉴别性，常用于临床样品、食品样品中革兰氏阴性致病菌的分离与初步鉴定。

2. 伊红美蓝培养基（Eosin-Methylene Blue Agar, EMB）

配方（1000mL）：蛋白胨10g、乳糖10g、K2HPO4 2g、伊红Y 0.4g、美蓝0.065g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（灭菌后倒平板）。

用途：选择性分离革兰氏阴性菌，抑制革兰氏阳性菌；鉴别乳糖发酵菌，其中大肠杆菌发酵乳糖产酸，使菌落呈紫黑色、有金属光泽，其他乳糖发酵菌形成粉红色菌落，非发酵菌形成无色菌落。

特点：鉴别效果更精准，常用于大肠杆菌的分离与鉴定，是环境卫生、食品卫生检测中的常用培养基。

3. SS培养基（Salmonella-Shigella Agar）

配方（1000mL）：蛋白胨5g、牛肉膏5g、乳糖10g、NaCl 5g、柠檬酸钠8.5g、硫代硫酸钠8.5g、中性红0.025g、煌绿0.001g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2（灭菌后倒平板，煌绿需过滤除菌后加入）。

用途：选择性分离沙门氏菌、志贺氏菌等肠道致病菌，抑制大肠杆菌等杂菌生长（柠檬酸钠、煌绿的作用）；鉴别乳糖发酵菌，致病菌多为非发酵菌，形成无色菌落，大肠杆菌等杂菌形成红色菌落。

特点：选择性强，对肠道致病菌的分离效果好，常用于临床粪便样品、食品样品的致病菌筛查。

（三）鉴别培养基

1. 糖发酵管（单糖/双糖发酵管）

配方（1000mL）：蛋白胨10g、NaCl 5g、糖（葡萄糖/乳糖/蔗糖等）10g、溴甲酚紫指示剂0.04g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（分装试管，加倒置杜氏小管，灭菌后备用）。

用途：鉴别细菌对不同糖类的发酵能力，判断细菌的代谢特性，用于细菌的分类鉴定（如大肠杆菌发酵葡萄糖产酸产气，沙门氏菌发酵葡萄糖产酸不产气）。

特点：操作简便，针对性强，可根据需求选择不同糖类配置。

2. 三糖铁培养基（Triple Sugar Iron Agar, TSI）

配方（1000mL）：蛋白胨20g、牛肉膏5g、乳糖10g、蔗糖10g、葡萄糖1g、FeSO4 0.2g、Na2S2O3 0.3g、酚红指示剂0.025g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.4（分装试管，制成斜面+底层，灭菌后备用）。

用途：鉴别肠道细菌的代谢特性，可判断细菌是否发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖，是否产生硫化氢，常用于沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌的初步鉴定。

特点：可同时检测多种代谢指标，结果直观，是肠道细菌鉴定的核心培养基之一。

二、放线菌常用培养基

放线菌为革兰氏阳性菌，营养需求特殊，多需要复杂的有机氮源（如蛋白胨、酵母膏），且偏好中性至微碱性环境，常用培养基以淀粉、纤维素等为碳源，适配放线菌的分离、培养及产孢。

1. 高氏一号培养基（Gause's No.1 Medium）

配方（1000mL）：淀粉20g、KNO3 1g、K2HPO4 0.5g、MgSO4·7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、FeSO4·7H2O 0.01g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（121℃灭菌20min）。

用途：放线菌的基础培养基，适用于大多数放线菌（如链霉菌、诺卡氏菌）的分离、纯化、培养及形态观察，是放线菌实验室最常用的培养基。

特点：淀粉为主要碳源，硝酸钾为氮源，营养成分适配放线菌的生长需求，能促进放线菌产孢，菌落形态清晰。

2. 察氏培养基（Czapek Medium）

配方（1000mL）：蔗糖30g、NaNO3 3g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g、KCl 0.5g、FeSO4·7H2O 0.01g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2（灭菌条件同高氏一号培养基）。

用途：适用于放线菌及霉菌的分离培养，尤其适合青霉菌、曲霉菌及部分放线菌的生长，也可用于筛选放线菌的营养缺陷型菌株。

特点：营养成分简单，蔗糖为碳源，硝酸钠为氮源，选择性较弱，可作为放线菌与霉菌的共培养基础培养基。

3. 淀粉-酪素培养基

配方（1000mL）：淀粉10g、酪素0.3g、KNO3 1g、K2HPO4 0.5g、MgSO4·7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、FeSO4·7H2O 0.01g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4（灭菌后倒平板）。

用途：选择性分离放线菌，酪素可抑制部分细菌和霉菌生长，同时为放线菌提供有机氮源，适用于土壤中放线菌的分离纯化。

特点：选择性较强，能有效减少杂菌污染，提高放线菌的分离效率。