Western Blot（蛋白质免疫印迹）是细胞与分子生物学领域中常用的核心技术之一，其核心原理是通过凝胶电泳实现蛋白质的分子量分离，再将分离后的蛋白质转移至固相支持膜（如硝酸纤维素膜、PVDF膜），最后利用抗原与抗体的特异性结合反应，实现目标蛋白质的定性与半定量检测。该技术凭借高特异性、高灵敏度的优势，能够从细胞或组织提取的复杂蛋白质混合物中精准识别目标蛋白，为蛋白质相关研究提供直接的实验依据。

从技术本质来看，Western Blot的实现依赖三大关键环节：一是基于分子量的分离，利用SDS-PAGE凝胶的分子筛效应，使不同分子量的蛋白质在电场中呈现不同迁移速率，从而实现分离；二是固相转移，通过电场作用将凝胶中的蛋白质转移至膜上，形成稳定的蛋白印迹；三是特异性标记与检测，借助一抗对目标蛋白的特异性识别和二抗的信号放大作用，结合化学发光、荧光等检测方式，最终实现目标蛋白的可视化。相较于其他蛋白质检测技术，Western Blot兼具分离与鉴定功能，且操作流程相对可控，是生命科学研究中蛋白质分析的基础手段。